استفاده از روش کالیبراسیون مرتبه دوم برای اندازه گیری افلاتوکسین ها در نمونه های پسته با تکنیک کروماتوگرافی مایع با آشکارساز آرایه دیود

در این رساله اندازه گیری همزمان افلاتوکسین های b1، b2، g1 و g2 در نمونه های پسته مورد مطالعه قرار گرفته است. روش آماده سازی نمونه ها بر اساس استخراج با حلال (se) و سپس استخراج با فاز جامد (spe) با استفاده از کارتریج bond elut c18 بوده است. تکنیک دستگاهی استفاده شده برای اندازه گیری، کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا با آشکارساز آرایه دیود (hplc-dad) بوده است. از آن جا که مراحل تغلیظ و تصفیه برای نمونه ی پیچیده ای مانند پسته برای آنالیت های مورد نظر به طور گزینش پذیر عمل نمی کند، بهره بردن از مزیت مرتبه ی دوم با استفاده از ابزار کمومتریکس که توانایی اندازه-گیری غلظت گونه های هدف را در حضور گونه های مزاحم ناشناخته امکان پذیر می کند، ضروری به نظر می رسد. بنابراین در کار مذکور از یکی از تکنیک های کالیبراسیون مرتبه ی دوم به نام تفکیک سه تایی خطی متناوب (atld) برای آنالیز داده-های hplc-dad استفاده شده است. داده های سه بعدی جهت آنالیز (atld) با دسته کردن چندین ماتریس به دست آمده از اجراهای متوالی hplc به دست آمده است. یکی از این ماتریس ها، داده ی مربوط به نمونه مجهول است. این ماتریس قبل از آنالیز سه بعدی پیش پردازش شده است. به طوری که مراحل مختلف تصحیح خط زمینه، تصحیح جابه جایی زمان بازداری بر روی آن انجام شده است. در مرحله ی پیش بینی، داده های کالیبراسیون انتقال یافته با استفاده از استانداردسازی مستقیم تکه ای (pds) به کار رفته اند. نتایج atld بر روی یک سری از نمونه های پسته ی اضافه شده برای اندازه گیری آنالیت ها موفقیت آمیز بوده است. مقادیر بازیابی های به دست آمده 96/65 تا 107/58، 88/65 تا 48/136، 34/97 تا 17/115، 92/100 تا 74/112، برای افلاتوکسین های به ترتیب b1، b2، g1 و g2 بوده است. مقادیر lod، 54/0، 11/0، 49/0، ng g-171/0 برای افلاتوکسین های به ترتیب b1، b2، g1 و g2 بوده است. در نهایت روش پیشنهاد شده برای اندازه گیری افلاتوکسین های نمونه های پسته آلوده ی طبیعی به کار برده شد. نتایج atld تطابق مناسبی با نتایج به دست آمده توسط روش متداول اندازه گیری افلاتوکسین ها با ستون های ایمونوافینیتی نشان می دهد. بنابراین این روش به عنوان پیشنهادی نویدبخش جهت آنالیز افلاتوکسین ها در نمونه های پسته می تواند در نظر گرفته شود.